敌百虫用作杀虫剂时适用于水稻、麦类、蔬菜、茶树、果树、桑树、棉花等作物上的咀嚼式口器害虫，及家畜寄生虫、卫生害虫的防治；作为有机磷杀虫剂。高效、低毒、低残留、广谱性杀虫剂，以胃毒作用为主，兼有触杀作用，也有渗透活性。
储存需要注意的几点储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。包装密封。应与氧化剂、碱类分开存放，切忌混储。配备相应品种和数量的消防器材。储区应备有合适的材料收容泄漏物。
敌百虫对畜禽体外寄生虫杀灭效果较好，用注射器喷入羊鼻腔。治疗疥螨，用1%~3%的敌百虫溶液局部涂擦，效果较好。也可用0.1%~0.15%的敌百虫溶液洗浴治疗鸡虱等。此外用0.1%~0.15%的敌百虫溶液喷洒地面，可杀灭虱、蚤、蜱、蚊、蝇等。
敌百虫的杀虫作用主要不是取决于它本身的毒力，而是在害虫体内，敌百虫能转变成比它的毒力大数倍的敌敌晨，使害虫中毒死亡。但是，在人畜体内，敌百虫只有很小一部分转变成敌敌畏，绝大部分很快分解成无毒的化合物，并能很快由尿排出体外，故敌百虫对人畜的毒性是很低的。
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